酶標(biāo)儀濾光片應(yīng)用介紹
酶標(biāo)儀是一種用于閱讀和分析酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)結(jié)果的專業(yè)儀器,酶聯(lián)免疫反應(yīng)(ELISA)是由酶催化的顯色底物耦合到抗原或抗體上進(jìn)行的。反應(yīng)結(jié)果以顏色顯示。樣品中抗體或抗原的濃度可通過(guò)顯色反應(yīng)的深度,即吸光度值來(lái)確定。隨著檢測(cè)方法的發(fā)展,具有多種檢測(cè)方式的臺(tái)式酶標(biāo)儀被稱為多功能酶標(biāo)儀,它可以檢測(cè)abs、fi、trf、fp和lum。
酶標(biāo)儀原則上分為光柵式和濾光片式。光柵酶標(biāo)儀能截取光源波長(zhǎng)范圍內(nèi)的任意波長(zhǎng),而后者只能根據(jù)選定的生化儀器干擾濾光片截取特定波長(zhǎng)。
酶標(biāo)儀工作原理:
酶標(biāo)的原理是檢測(cè)被測(cè)物在特定波長(zhǎng)的吸光度。光源發(fā)出的光波穿過(guò)濾光片,變成單色光束,進(jìn)入試樣,在塑料微孔桿中測(cè)試,其中一部分被吸收,另一部分被樣品照射到光電探測(cè)器上,光電探測(cè)器將樣品不同強(qiáng)度的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào)。經(jīng)過(guò)預(yù)放大、對(duì)數(shù)放大、模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后,將電信號(hào)發(fā)送給微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算。最后,由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果。
酶標(biāo)儀濾光片的放置:
當(dāng)使用濾光片時(shí),與普通比色計(jì)一樣,酶譜儀的濾光片可以放在微孔板的前面或后面。或者聚光鏡后面到達(dá)反射鏡。在鏡面90度反射后,濾光片垂直通過(guò)比色溶液,然后通過(guò)濾光片送到光電管。
酶標(biāo)儀檢測(cè)什么?
當(dāng)光穿過(guò)被測(cè)物體時(shí),探測(cè)物體前后的能量差是被探測(cè)到的物質(zhì)吸收的能量。在特定波長(zhǎng)下,同一探測(cè)物體的濃度與吸收能量有定量關(guān)系,用OD值表示。OD是光密度的縮寫,表示被檢測(cè)物質(zhì)吸收的光密度。
檢測(cè)結(jié)果的影響因素:
由于影響檢測(cè)結(jié)果的因素很多,如不同的酶標(biāo)板,檢測(cè)試劑的體積會(huì)導(dǎo)致不同的OD值,所以只有使用相同的酶標(biāo)板反應(yīng)試劑檢測(cè)結(jié)果才能進(jìn)行比較和分析。
酶標(biāo)儀的用途:
應(yīng)用于低紫外區(qū)的報(bào)告基因檢測(cè)及G蛋白偶聯(lián)受體分析、DNA、RNA定量及純度分析和蛋白定量,酶活、酶動(dòng)力學(xué)檢測(cè)、細(xì)胞凋亡檢測(cè)、酶聯(lián)免疫測(cè)定、細(xì)胞增殖與毒性分析等。
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